實(shí)驗(yàn)原理
Western Blot是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法。其基本原理是通過(guò)聚丙烯酰胺凝膠電泳分離細(xì)胞或者組織樣本中的蛋白,經(jīng)轉(zhuǎn)膜、封閉后目標(biāo)蛋白與特有性一抗結(jié)合,再與辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的第二抗體起反應(yīng),經(jīng)過(guò)底物顯色,分析曝光條帶的位置和灰度分析獲知目標(biāo)蛋白在樣本中的表達(dá)情況。該法結(jié)合了凝膠電泳和固相免疫測(cè)定兩種技術(shù)的高特異性和高敏感性,可以對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行定型和半定量的分析。
實(shí)驗(yàn)流程
結(jié)果展示